體外消化率法之所以用于環(huán)保飼料的開(kāi)發(fā)，是因?yàn)樵摲椒茉谳^短時(shí)間內(nèi)了解飼料原料的消化率數(shù)值，并能模擬每種魚(yú)類(lèi)的腸道環(huán)境，對(duì)單一飼料進(jìn)行消化率數(shù)值的測(cè)定，因而能較準(zhǔn)確的判斷出魚(yú)類(lèi)對(duì)具體的某種飼料原料的消化吸收情況，從而很好的指導(dǎo)飼料配方，為優(yōu)質(zhì)環(huán)保飼料的開(kāi)發(fā)提供最直接的參考數(shù)據(jù)。下面將體外消化率法的一些內(nèi)容簡(jiǎn)單介紹如下，并附帶介紹一下我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
1、體外消化率測(cè)定方法的原理
體外消化率測(cè)定方法的飼料樣品在酶的作用下將不溶性的大分子物質(zhì)（如不溶性蛋白質(zhì)、淀粉等）降解為可溶性的小分子物質(zhì)（如肽、氨基酸、糊精、葡萄糖等），在體內(nèi)這些降解產(chǎn)物可被動(dòng)物消化道吸收進(jìn)入體內(nèi)，在離體條件下，這些物質(zhì)可溶解于水中，最后，以產(chǎn)生的可溶解物質(zhì)量占飼料樣品未消化前的百分比表示消化率的大小。
2、酶選擇
在體外消化率的初期，為篩選消化率高的飼料原料。一般采用多酶片作為體外消化率的主要用酶；在體外消化率的中后期，主要是通過(guò)提取魚(yú)類(lèi)腸道（有胃魚(yú)類(lèi)可采用胃部粗酶液一腸道粗酶液兩步酶解法，而對(duì)于無(wú)胃魚(yú)類(lèi)，則可用腸道粗酶液）消化酶來(lái)進(jìn)行體外消化率的實(shí)驗(yàn)，以確定不同魚(yú)類(lèi)對(duì)原料消化吸收情況的差異，從而篩選出魚(yú)類(lèi)對(duì)不同原料的消化吸收數(shù)值，并依據(jù)動(dòng)物性飼料與植物性飼料的分類(lèi)體系（動(dòng)物性飼料在我們進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中其數(shù)值與植物性飼料相比明顯偏低，然而在實(shí)際應(yīng)用中我們往往認(rèn)為動(dòng)物性飼料比植物性飼料更易被動(dòng)物消化吸收，即動(dòng)物性飼料的氨基酸平衡要好于植物性飼料，故我們按照植物性與動(dòng)物性飼料分類(lèi)，把它們的消化率進(jìn)行縱向比較，而不進(jìn)行橫向比較）對(duì)常用飼料原料進(jìn)行體外消化率數(shù)值由低到高排列，從而為飼料配方時(shí)飼料原料的優(yōu)先選擇及飼料原料的用量比例提供參考。
3、實(shí)驗(yàn)方法
3.1腸道粗酶液法
3.1.1腸道粗酶液的提取
(1)解剖正常吃食的元胃活魚(yú)，取魚(yú)體全部腸道，將腸道內(nèi)容物擠凈、剪開(kāi)，并用濾紙吸干腸道內(nèi)外水分，稱(chēng)重并記錄。
(2)將腸道剪碎，加入10倍（重量體積比）冷卻的磷酸緩沖溶液，放人組織勻漿機(jī)（或玻璃勻漿器）中勻漿。
(3)將勻漿好的腸道液無(wú)損轉(zhuǎn)移到離心機(jī)中，在3000r/m轉(zhuǎn)速下，離心15分鐘，取上清液，此為腸道粗酶液。
3.1.2樣品消化
(1)樣品的粉碎：欲消化的樣品應(yīng)通過(guò)40目金屬篩。
(2)稱(chēng)樣：稱(chēng)取需消化的飼料原料或成品0.5—1.0克（視樣品蛋白含量的高低，高則少稱(chēng)，低則多稱(chēng)），無(wú)損失地轉(zhuǎn)入15ml已知重量的離心管中。每個(gè)樣品做2～3個(gè)平行。
(3)混合i準(zhǔn)確吸取lOml腸道粗酶液，轉(zhuǎn)入需加酶液的離心管中，蓋上管塞，并充分混勻。
(4)消化：將上述已加好酶液的離心管，放到36℃的恒溫振蕩器中，振蕩頻率控制在125次／分左右。每隔30～40分鐘將每個(gè)消化管拿出來(lái)手工振蕩一次。消化時(shí)間在12～14小時(shí)（低蛋白樣品需要時(shí)間短，高蛋白樣品需要時(shí)間長(zhǎng)）。
(5)洗滌：將消化好的樣品離心(轉(zhuǎn)速300JOr/m)15分鐘，棄去上清液，在36℃的蒸餾水洗滌2～3次。
(6)烘干：將沖洗干凈的消化好的樣品，放入烘箱中烘干，烘箱溫度控制在75～850C，直至烘至恒重。稱(chēng)重并記錄。
3.1.3測(cè)定
(1)用凱氏定氮法測(cè)定消化前及消化后樣品的粗蛋白含量，記錄測(cè)定數(shù)值。
備注：空白消化率是指在樣品中加入煮沸酶液進(jìn)行體外消化的消化率數(shù)值，計(jì)算方法同上。
3.2多酶片法
多酶片法比較簡(jiǎn)單，將多酶片粉碎后直接加緩沖液并進(jìn)行離心即可制得酶液，其它操作同腸道粗酶液法。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
我們目前已進(jìn)行了常用原料的多酶片篩選實(shí)驗(yàn)與部分魚(yú)類(lèi)的體外消化率實(shí)驗(yàn)，下面僅介紹一下我們用多酶片法測(cè)定的部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5、討論
多酶片篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果可用于對(duì)原料的篩選上，例如我們通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口魚(yú)粉的體外消化率在88%左右，而優(yōu)質(zhì)國(guó)產(chǎn)魚(yú)粉的消化率在82%左右，于是我們可以制定出標(biāo)準(zhǔn)魚(yú)粉樣，然后拿其它的魚(yú)粉樣與之一起進(jìn)行體外消化率數(shù)值的對(duì)比測(cè)定，這樣就可以淘汰不合格原料。另外我們用提取的魚(yú)腸道粗酶液對(duì)常用水產(chǎn)飼料原料魚(yú)粉、棉粕、豆粕、菜粕等11種原料進(jìn)行體外消化試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)這些原料的體外消化率值比用體內(nèi)消化法測(cè)定結(jié)果低，這可能是因?yàn)轶w外與體內(nèi)的消化環(huán)境有差異。體內(nèi)消化時(shí)，未被消化的食物團(tuán)到達(dá)腸道的某一部位，刺激該部位消化酶陸續(xù)釋放，而體外消化無(wú)法滿足這一條件。但從總體上看，體內(nèi)消化法測(cè)定的值與體外消化法測(cè)定的值有一定的相關(guān)性。我們參照西南農(nóng)大葉元土教授的試驗(yàn)的數(shù)據(jù)，將用三氧化二鉻作為指示劑測(cè)定的上述飼料原料的表觀消化率與我們體外消化率測(cè)定結(jié)果相比。
由此可見(jiàn)體外消化率方法可以有效地評(píng)價(jià)不同水產(chǎn)飼料原料的品質(zhì)，且所需時(shí)間短，能夠在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成，相對(duì)于體內(nèi)消化率法能節(jié)省大量的物力與財(cái)力，故體外消化率測(cè)定方法在篩選水產(chǎn)飼料原料上有廣泛的應(yīng)用前景。
相關(guān)顆粒機(jī)壓塊機(jī)產(chǎn)品：
1、秸稈顆粒機(jī)
2、秸稈壓塊機(jī)
